細(xì)胞學(xué)堂 | 293細(xì)胞系家族譜系大揭秘

HEK293細(xì)胞的歷史可以追溯到1973年，當(dāng)時(shí)荷蘭萊頓大學(xué)的Alex Van Der Eb博士和Frank Graham博士在研究人類腺病毒（Adenovirus）時(shí)培養(yǎng)了這種細(xì)胞，細(xì)胞命名中的數(shù)字可以追溯到他的第293次實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的原始細(xì)胞克隆這一事實(shí)。通過腺病毒5（Ad5 DNA）進(jìn)行了轉(zhuǎn)染，由于存在Ad5 E1A/B基因，使其細(xì)胞周期以及細(xì)胞表型、核型等發(fā)生了改變，獲得永生化特性，在生產(chǎn)腺病毒載體和腺相關(guān)病毒載體、生產(chǎn)蛋白、疫苗、抗癌試劑以及細(xì)胞生物學(xué)研究上廣泛應(yīng)用。

目前為止，HEK293細(xì)胞有多種衍生細(xì)胞系，每種細(xì)胞系的特點(diǎn)不盡相同，用途也存在著差異。今天小普給大家介紹下有關(guān)293T、293F、293H和293S四大分支細(xì)胞的特點(diǎn)及用途。

HEK293細(xì)胞系及其衍生/歷史的示意圖

HEK293T

它是HEK293細(xì)胞系的亞克隆，經(jīng)過修飾表達(dá)SV40 T抗原，其表達(dá)的SV40T抗原可以實(shí)現(xiàn)外源表達(dá)載體的擴(kuò)增，最終增加目的基因表達(dá)，常用于慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒及腺病毒的包裝。

HEK293H

來(lái)自表達(dá)E1A腺病毒基因的HEK293細(xì)胞，粘附性較強(qiáng)，常用于噬菌斑檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和重組蛋白的表達(dá)和生產(chǎn)。在293H細(xì)胞中插入EBNA-1基因可得到293E，該基因含有EBV復(fù)制起點(diǎn)（oriP）的重組表達(dá)載體，能夠在H293E細(xì)胞中復(fù)制，顯著提高蛋白的表達(dá)；293-6E細(xì)胞是在293-H細(xì)胞表達(dá)截?cái)嗟腅BNA1，其能夠在無(wú)血清培養(yǎng)體系中進(jìn)行蛋白表達(dá)及病毒載體的生產(chǎn)。

HEK293F

由HEK293細(xì)胞系衍生的一個(gè)可以在無(wú)血清培養(yǎng)基中快速增長(zhǎng)的細(xì)胞系，可以高效表達(dá)蛋白。由293F細(xì)胞導(dǎo)入pCMVSPORT6TAg.Neo質(zhì)?？色@得293FT，可以用于生產(chǎn)慢病毒載體和基因編輯等領(lǐng)域。293FTM細(xì)胞是由Flp-InTM T-RExTM 293細(xì)胞導(dǎo)入單嗜性（ecotropic）報(bào)告質(zhì)粒和MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap) 報(bào)告質(zhì)粒獲得，常用于蛋白互作篩選。

HEK293S

用逐漸適應(yīng)性培養(yǎng)的方法，將細(xì)胞馴化成能夠懸浮培養(yǎng)且耐受低Ca²⁺培養(yǎng)的細(xì)胞系，即293S細(xì)胞。293S細(xì)胞用甲烷磺酸誘變和蓖麻毒素選擇修飾，再轉(zhuǎn)染pcDNA6/TR質(zhì)粒，得到293SG細(xì)胞，常用于同源的N-糖基化蛋白的表達(dá)。此外，該細(xì)胞系中具有四環(huán)素表達(dá)抑制基因，也可用于四環(huán)素誘導(dǎo)的蛋白表達(dá)研究。；用pcDNA3.1-zeo-STendoT質(zhì)粒對(duì)293SG細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化，得到293SGGD細(xì)胞，用于糖基化工程研究中。